一次讲清酶标仪的使用方法

　　酶标仪（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）是一种常用的生物化学分析方法，用于检测和定量分析样品中特定物质的存在和浓度。下面是酶标仪的使用方法的一般步骤：

　　1. 准备样品和试剂：收集样品并进行必要的预处理，如稀释、提取、去除杂质等。同时准备好所需的试剂，包括酶标板、酶标抗体、底物、洗涤缓冲液等。

　　2. 酶标板涂层：将目标抗原或抗体溶液加入酶标板孔中，使其吸附在孔底，形成固相。通常需要将酶标板放置在4°C的冰箱中一定时间，使抗原或抗体充分与酶标板结合。

　　3. 孔洗涤：在每个孔中添加洗涤缓冲液，将其倒出，重复该步骤多次，以去除未结合的抗原或抗体，减少非特异性背景信号。

　　4. 样品加入：将样品加入酶标板的相应孔中，通常有标准曲线样品和待测样品。样品可以是血清、尿液、细胞上清等，可以通过稀释将其加入孔中。

　　5. 反应孔孵育：将酶标板封闭，并将其放入恒温箱或酶标仪中孵育一定时间，使抗原或抗体与样品中的目标物质结合。

　　6. 洗涤：使用洗涤缓冲液洗涤酶标板，去除未结合的物质。

　　7. 酶标抗体加入：将酶标抗体溶液加入酶标板的相应孔中，使其与样品中的目标物质结合。

　　8. 反应孔孵育：将酶标板封闭，并将其放入恒温箱或酶标仪中孵育一定时间，使酶标抗体与目标物质结合。

　　9. 洗涤：使用洗涤缓冲液洗涤酶标板，去除未结合的物质。

　　10. 底物加入：向每个孔中加入底物，底物