酶标仪(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种常用的生物化学分析技术,用于检测和定量分析样品中特定分子(如蛋白质、抗体、激素等)的存在和浓度。它的主要用途包括医学诊断、生物学研究、食品安全监测等领域。
酶标仪的工作原理基于酶的特异性反应和光学检测。一般来说,酶标仪的操作步骤包括以下几个关键步骤:
涂覆:将待检测物(如抗原或抗体)固定在试验板上,形成一个涂层。
阻断:加入阻断试剂,防止非特异性结合。
反应:加入待检测样品,使样品中的目标分子与涂层上的特异性抗体结合。
洗涤:通过洗涤步骤去除非特异性结合物。
探针:加入与目标分子结合的酶标记物(如酶标记的抗体),形成复合物。
洗涤:再次洗涤去除未结合的酶标记物。
底物添加:加入底物,使酶标记物催化反应生成可测量的信号物质(如发光、颜色变化等)。
读数:使用酶标仪测量信号的强度,根据标准曲线或计算得出待检测物的浓度。
酶标仪的工作原理基于特异性的抗体-抗原相互作用以及酶对底物的催化反应。通过测量底物反应生成的信号物质的光学性质,如吸光度、发光强度或颜色变化,可以间接地推测出样品中目标分子的存在和浓度。
酶标仪具有高灵敏度、高特异性和广泛的应用范围,因此被广泛应用于医学诊断、生物学研究和食品安全监测等领域。