荧光酶标仪与光吸收酶标仪原理及区别
作者:admin 时间:2021-07-02 01:07:33 点击次数:1284
一、荧光酶标仪原理
氙气弧光灯发出的光经过光切割机变成间歇光,激发光单色器变成单色光后,这种光就是荧光物质的激发光,被测荧光物质被激发,由光照射发出的荧光经单色器转化为单色荧光,然后照射到用于测量样品的光电倍增管上。由它产生的光电流被放大器放大并发送到记录器。激发光单色器和荧光单色器的光栅由电机驱动的凸轮控制。在绘制荧光发射光谱时,将激发光单色器的光栅固定在*合适的激发光波长上,旋转荧光单色器凸轮,改变每个波长的荧光强度信号输出到记录仪,记录的光谱就是发射光谱。
在测量荧光激发光谱时,将荧光单色仪的光栅固定在*合适的荧光波长上,只允许激发光单色端口的凸轮旋转,并将各波长激发光的强度信号输出到记录仪。光谱是激发。
对样品溶液进行定量分析时,将激发光单色仪固定在选定的激发光波长上,将荧光单色仪调整到选定的荧光波长,记录仪得到的信号就是样品溶液的荧光强度。
二、光吸收酶标仪原理
光是电磁波。波长在100nm-400nm之间的叫紫外光,在400nm - 780nm之间的光可以被人眼观察到,大于780nm的叫红外光。光吸收酶标仪的原理是检测分析物在特定波长的吸光度值。jjymafwh
光通过被检测物体前后的能量差就是被检测物体吸收的能量。在特定波长下,同一被测物体的浓度与吸收的能量有定量关系。
在特定波长下,每种物质都有自己特定的波长。在这个波长,物质可以吸收*多的光能。如果选择其他波长波段,检测结果会不准确。因此,在对检测对象进行测量时,我们选择一个特定的波长进行检测,称为测量波长。
然而,每种物质对光能仍有一定的非特异性吸收。为了消除这种非特异性吸收,我们选择了一个参考波长来消除这种不准确性。在参考波长处,检测对象的光吸收*小。酶标仪在检测波长和参考波长处的吸光度差可以消除非特异性吸收。